迈尔斯（沙梅克·摩尔 配音）的父亲是一位一板一眼的警官，而他的母亲则是一名工作勤奋的护士。慈爱的父母对于孩子的成就非常自豪，也希望他能够融入新加入的这所优秀的学校，在这里取得成功。然而迈尔斯的生活因为一次意外变得更加复杂。他被一只放射性蜘蛛咬伤，并因此获得了毒液冲击、伪装隐藏、蜘蛛爬行、超凡听力、蜘蛛感应等一系列超能力。与此同时，这座城市里最臭名昭着的犯罪头目金并（列维·施瑞博尔 配音）已经建立起一台高度隐秘的超级对撞机，这台对撞机开启了通往其他宇宙的时空通道，来自其他宇宙、不同版本的蜘蛛侠（包括中年彼得·帕克、女蜘蛛侠格温、暗影蜘蛛侠、蜘猪侠和潘妮·帕克）也来到了迈尔斯所在的世界。在这些新老角色的帮助下，迈尔斯慢慢学习、逐渐接受挑战，也学会了作为一名超级英雄所要承担的责任。他最终意识到，任何人都可以戴上超级英雄的面具，为正义而战……